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熒光定量PCR分析儀的日常維護、校準(zhǔn)與常見故障排查指南

更新時間:2025-10-28點擊次數(shù):520
  日常維護
  表面清潔:每周用軟布蘸取少量清水或70%酒精擦拭儀器外殼,避免試劑泄漏腐蝕表面。
  樣品孔維護:每3個月用洗耳球或軟毛刷清潔樣品孔灰塵,防止污染影響檢測;若被熒光物質(zhì)污染,需用90%酒精浸泡20分鐘后自然風(fēng)干。
  熱蓋保養(yǎng):定期用酒精或純水擦拭熱蓋,確保溫控性能良好;實驗結(jié)束后保持待機10分鐘,待模塊溫度降至室溫再關(guān)閉電源。
  環(huán)境要求:儀器需放置在干燥(濕度<85%)、無強磁場干擾的環(huán)境中,溫度控制在18-35℃,周圍留出20-30cm空間以保證散熱。
  校準(zhǔn)方法
  溫度校準(zhǔn):使用精密溫度探頭(精度≥0.01℃)置于加熱模塊中,通過溫度校準(zhǔn)裝置采集數(shù)據(jù),調(diào)整儀器溫度至設(shè)定值,確保溫控系統(tǒng)精確。
  熒光校準(zhǔn):引入熒光強度已知的DNA模板作為標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),檢測熒光信號并構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線,驗證信號與濃度的線性關(guān)系。
  CT值校準(zhǔn):通過擴增已知濃度模板,計算CT值與模板濃度的線性關(guān)系,保證擴增效率在90%-110%之間。
  常見故障排查
  熒光信號異常:檢查熒光探針或染料是否過期,清潔熒光濾光片和激光器表面,確保反應(yīng)體系質(zhì)量合格。
  溫度控制不穩(wěn)定:檢查加熱模塊和冷卻系統(tǒng)是否工作正常,重新校準(zhǔn)溫度傳感器,避免環(huán)境溫度波動影響結(jié)果。
  軟件或連接問題:更新或重新安裝軟件,檢查USB連接線是否松動,確保計算機與儀器連接穩(wěn)定。
  擴增效率低:優(yōu)化模板濃度和反應(yīng)體系,重新設(shè)計引物,確保試劑和模板無污染。

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